從19年底疫情開(kāi)始到現在,如果有一個(gè)行業(yè)實(shí)現乘風(fēng)波浪,那一定就是醫藥行業(yè)。從疫情初期的醫療防護用品的緊俏,到中期疫苗的研發(fā)與全民接種,直到現在的常態(tài)化核酸檢測,無(wú)一不是在推動(dòng)醫藥行業(yè)的發(fā)展。其中生物藥憑借其藥理活性高、特異性強、治療效果好、毒副作用較小的特點(diǎn),已在全球醫藥市場(chǎng)大放異彩。
在生物藥制備中離不開(kāi)細胞培養,培養基將為細胞生長(cháng)提供所需基本物質(zhì),并且其物質(zhì)組成會(huì )影響產(chǎn)品的產(chǎn)量和結構,所以對培養基的篩選尤為重要。
如何高效分析細胞培養基質(zhì)
細胞培養基質(zhì)中一般都含有氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機鹽、多肽、蛋白質(zhì)和其他類(lèi)化合物。細胞生長(cháng)過(guò)程中會(huì )消耗營(yíng)養物質(zhì),同時(shí)釋放目標生物藥物和廢棄產(chǎn)物。
氨基酸作為蛋白質(zhì)的基礎,同時(shí)也是許多代謝途徑的中間介質(zhì)。是培養基中的必須成分,為細胞增殖和生存提供原料,其濃度可影響細胞密度。監測和調整氨基酸的組成對于優(yōu)化生產(chǎn)過(guò)程,保證終產(chǎn)物的高質(zhì)量和高產(chǎn)量是很有必要的。
我們提供一種高效、快速的HPLC-柱后衍生法,利用陽(yáng)離子交換色譜結合茚三酮柱后衍生法可檢測對包括細胞培養基質(zhì)在內許多復雜基質(zhì)中的氨基酸進(jìn)行分析。
HPLC-柱后衍生法
圖1:流程圖
● 快速:ONYX PCX 搭載可程序升溫柱溫箱,可實(shí)現30min快速檢測幾十種氨基酸;
● 重復性高:柱后衍生方法具有很好的靈敏性、重復性和穩定性;
● 操作簡(jiǎn)便:直接與HPLC連用,基質(zhì)中的大部分化學(xué)物質(zhì)不會(huì )干擾分析,分析前只需檸檬酸鹽緩沖溶液稀釋樣品并過(guò)濾;
● 提供應用方案。
圖2:細胞培養基樣品色譜圖
該方法已經(jīng)成為并且將一直是實(shí)驗室測試生物樣品、蛋白質(zhì)和多肽以及食品分析的重要方法。